Quantum Nufect™

獨家緩衝溶液系統,能進行高效基因遞送並維持高細胞存活率

基因改造細胞治療是將遺傳物質送進細胞的一種工程,其成功與否高度仰賴細胞工程的效率以及產量,將「治療性基因」透過病毒或非病毒的方式將基因載體遞送進細胞核中。相較於病毒載體,非病毒載體在遞送遺傳物質有多項優勢,然而,儘管擁有多項優勢,非病毒載體仍然有些待克服的挑戰。
其中一個挑戰便是提升基因傳遞效率。 現今,電穿孔是最有效的基因傳遞方式之一,並且被廣泛應用於非病毒基因的治療當中。然而,於電穿孔之後,細胞的存活率與增殖能力通常會大幅下降。 先驅生技的 Quantum Nufect™ 技術成功克服了電穿孔後基因傳遞效率低與細胞存活率低的問題。

Quantum Nufect™ 是一種高效率、具成本效益的通用電穿孔緩衝系統。結合各類電穿孔儀器(包含但不限於Lonza的Nucleofector™),可有效將DNA、RNA或是蛋白質遞送至多種細胞種類,且對細胞存活率的影響及小。
我們實驗證實, Quantum Nufect™ 能夠高效地將載體遞送至多種難以轉染的細胞種類,包含人類初代T細胞 (見 圖1).

圖1. Quantum Nufect™ 可有效轉染細胞株及初代細胞Quantum Nufect™ 可將含綠色螢光蛋白(pBRIGHT-GFP)的質體有效轉染至多種細胞類型當中,包括人類初代細胞:(A) 人類間質幹細胞 (hMSC)、顆粒神經元以及CD8+ T細胞(pMax-GFP見A);此外,緩衝液系統也能促進(B)常用的HEK293細胞株與難以轉染的C17.2細胞株;(C) Quantum Nufect™ 與Lonza的Human T Cell Nucleofector™ (HTCN)轉染緩衝液系統進行比較時, Quantum Nufect™ 顯示明顯更高的活細胞轉染效率。更重要的是, Quantum Nufect™ 維持更高的細胞存活率(PI染色因性細胞為96%) ,相較之下,使用Lonza的HTCN緩衝液轉染系統後存活率僅剩41%。細胞活性以PI因性細胞百分比表示(紫色區域, R2),轉染效率則以GFP陽性且PI陰性細胞的比例來表示(綠色區域),兩者皆是相對於總細胞數,實驗均使用Lonza的Nucleofector 2B儀器進行。
我們進一步證實,在 CAR-T細胞製程當中, Quantum Nufect™ 不僅能維持基因改造後T細胞的活性,也可提升其在電穿孔後的增殖能力,最終可產出明顯更高比例的CAR+ T細胞(見 圖2).
